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細胞凋亡

        細胞凋亡（Cell Apoptosis）是指為維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定，由基因控制的細胞自主的有序的死亡。細胞凋亡與細胞壞死不同，細胞凋亡不是一件被動的過程，而是主動過程，它涉及一系列基因的激活、表達以及調(diào)控等的作用。

細胞凋亡檢測常用的方法為AnnexinV/PI雙染法流式檢測。其原理為：正常細胞中，磷脂酰絲氨酸（PS）只分布在細胞膜內(nèi)側(cè)，但在細胞凋亡早期， PS從細胞膜內(nèi)側(cè)翻向外側(cè)至膜表面。Annexin V是一種分子量為35~36kD的Ca²⁺依賴性磷脂結(jié)合蛋白，可以與磷脂酰絲氨酸特異性結(jié)合，將Annexin V進行熒光素（FITC）標(biāo)記作為熒光探針，利用熒光顯微鏡或流式細胞儀可檢測細胞早期凋亡的發(fā)生。碘化丙啶（propidine iodide，PI）是一種核酸染料，它不能透過完整的細胞膜，無法進入活細胞內(nèi)部，但對凋亡中晚期的細胞和死細胞，PI 能夠透過細胞膜而使細胞核紅染。因此將Annexin V 與PI 匹配使用，就可以將凋亡早晚期的細胞以及死細胞區(qū)分開來。

細胞凋亡過程中染色體DNA發(fā)生斷裂，脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶介導(dǎo)的缺口末端標(biāo)記法（TUNEL）利用脫氧核糖核苷酸末端轉(zhuǎn)移酶（tdt)的作用將斷裂缺口產(chǎn)生的DNA3'-oh與生物素相連接，使斷裂DNA染色，從而分析凋亡細胞。

應(yīng)用領(lǐng)域

1，免疫學(xué)應(yīng)用，胸腺細胞成熟過程的凋亡，活化誘導(dǎo)的細胞凋亡；

2，臨床應(yīng)用，HIV感染發(fā)病機制研究，腫瘤發(fā)生機制研究；

3，自身免疫疾病研究。

服務(wù)流程

1，細胞培養(yǎng)，調(diào)整細胞懸液濃度后接種細胞培養(yǎng)板

2，藥物處理

3，相關(guān)檢測時間點細胞收集

4， {C}Annexin V-FITC、PI染料避光孵育

5，上機流式檢測

6，數(shù)據(jù)分析與結(jié)果展示

樣本要求

1，需要用戶提供待檢測細胞，細胞數(shù)大于10⁶，

2，提供藥品，藥物作用方式（濃度以及時間）。

3，符合樣品運輸要求。